توضیحات

فهرست مطالب

فصل اول:کلیات

۱-۱-نانو ذرات نقره…………………………………………………………………………………………………….. ۲
۱-۱-۱- مکانیزم های کلی برای عملکرد نانونقره………………………………………………………………… ۴
۱-۱-۲- مزایای فن آوری نانو سیلور……………………………………………………………………………….. ۵
۱-۱-۳-کاربردهایی از نانوذرات نقره……………………………………………………………………………….. ۶
۱-۱-۴- کاربرد در پزشکی ………………………………………………………………………………………….. ۶
۱-۱-۵-استفاده از نانونقره در مصارف ضد میکروبی……………………………………………………………. ۷
۱-۱-۶- مزایای نانو ذرات نقره نسبت به آنتی بیوتیک ها …………………………………………………….. ۸
۱-۱-۷- مقدمه ای برتحقیقات انجام شده در زمینه نانو فناوری……………………………………………….. ۹
۱-۱-۸-کاربردهای متعدد نانو فن آوری در زیست شناسی و پزشکی عبارتند از………………………… ۱۱
۱-۱-۹- نانو تکنولوژی ………………………………………………………………………………………………. ۱۳
۱-۱-۱۰- دسته بندی نانو مواد………………………………………………………………………………………. ۱۴
۱-۱-۱۱- نانو بیوتکنولوژی ومیکروبیولوژی………………………………………………………………………. ۱۴
۱-۱-۱۲- روش های سنتز نانو مواد……………………………………………………………………………….. ۱۵
۱-۱-۱۲-۱- روش سل – ژل برای سنتز نانو ذره……………………………………………………………….. ۱۶
۱-۱-۱۲-۲-دلایل محبوبیت های روش سل – ژل …………………………………………………………….. ۱۶
۱-۱-۱۳- نقره (Silver) ……………………………………………………………………………………………… 17
۱-۱-۱۴- مشخصات فلز نقره ……………………………………………………………………………………… ۱۸
۱-۱-۱۵- نحوه عمل نانو نقره ………………………………………………………………………………………. ۱۸
۱-۱-۱۶-معرفی میکروارگانیسم های مورد استفاده در این تحقیق…………………………………………… ۱۹
۱-۱-۱۶-۱- Pseudomonas aeruginosa………………………………………………………………………… 19
۱-۱-۱۶-۲- Staphylococcus aureus……………………………………………………………………………. 21
۱-۱-۱۶-۳-Escherichia coli……………………………………………………………………………………… 22
۱-۱-۱۷- آنتی بیوگرام (آزمایش های حساسیت دارویی)…………………………………………………….. ۲۳
۱-۱-۱۷-۱-آنتی بیوگرام دیسک دیفیوژن…………………………………………………………………………. ۲۴
۱-۱-۱۷-۲-محیط نیم مک فارلند…………………………………………………………………………………… ۲۵
۱-۱-۱۷-۳- نحوه خواندن وگزارش کردن……………………………………………………………………….. ۲۵
۱-۱-۱۷-۴- خطا های تست آنتی بیوگرام ………………………………………………………………………. ۲۶
۱-۱-۱۷-۵-دیسک های مورد استفاده در آنتی بیوگرام………………………………………………………… ۲۷
۱-۱-۱۷-۶-محیط کشت در آنتی بیوگرام ……………………………………………………………………….. ۲۷

فصل دوم:مواد وروش ها

۲-۱-تجهیزات آزمایشگاهی مورد استفاده در تحقیق……………………………………………………………. ۳۰
۲-۱-۱- وسایل ودستگاه های مورد استفاده در آزمایش……………………………………………………….. ۳۰
۲-۲- دستگاه های آنالیز کننده……………………………………………………………………………………….. ۳۲
۲-۳- مواد شیمیایی مورد نیاز………………………………………………………………………………………… ۳۳
۲-۳-۱-مواد شیمیایی مورد استفاده در سنتز نقره آلومینا……………………………………………………….. ۳۳
۲-۴-وسایل مورد نیاز برای انجام تست آنتی باکتریال ………………………………………………………… ۳۴
۲-۴-۱- وسایل مورد نیاز در روش دیسک دیفیوژن ،MIC و MBC………………………………………. 34
۲-۴-۲- معرف ها …………………………………………………………………………………………………….. ۳۴
۲-۴-۳- میکرو ارگانیسم های مورد استفاده………………………………………………………………………. ۳۵
۲-۴-۴- محیط های کشت آزمایشگاهی …………………………………………………………………………. ۳۵
۲- ۴-۵- دستگاه ها …………………………………………………………………………………………………… ۳۵
۲-۴-۶- مواد مورد نیاز برای تهیه  نیم مک فارلند………………………………………………………………. ۳۵
۲-۵- روش کار ……………………………………………………………………………………………………….. ۳۵
۲-۵-۱-سنتز ماده بوهمیت AlOOH   به روش سل – ژل……………………………………………………. ۳۵
۲-۵-۲-تهیه بوهمیت نقره……………………………………………………………………………………………. ۳۹
۲-۶- روش های شناسایی نقره آلومینا  سنتز شده ……………………………………………………………… ۴۰
۲-۶-۱-پراش پرتو ایکس(XRD)………………………………………………………………………………….. 41
۲-۶-۲- میکروسکوپ الکترونی عبوری (TEM)……………………………………………………………….. 44
۲-۷-تاثیر نانو سیلور سنتز شده بر روی میکروارگانیسم های مربوطه……………………………………….. ۴۹
۲-۷-۱- جداسازی اشرشیا کلی از بیماران………………………………………………………………………… ۴۹
۲-۷-۲- جداسازی  استافیلوکوکوس اورئوس……………………………………………………………………. ۵۰
۲-۷-۳- جداسازی سودوموناس ائروژینوزا……………………………………………………………………….. ۵۰
۲-۸- تست های بیوشیمیایی…………………………………………………………………………………………. ۵۱
۲-۸-۱- تست اکسیداز……………………………………………………………………………………………….. ۵۱
۲-۸-۲- تست کاتالاز…………………………………………………………………………………………………. ۵۱
۲-۸-۳-  تست تولید اندول………………………………………………………………………………………….. ۵۱
۲-۸-۴- تست متیل رد……………………………………………………………………………………………….. ۵۱
۲-۸-۵- تست وژسپروسکائر………………………………………………………………………………………… ۵۲
۲-۸-۶- تست استفاده از سیترات…………………………………………………………………………………… ۵۲
۲-۸-۷- تست SIM _{…………………………………………………………………………………………………………………………………….} 52
۲-۸-۸- تست اوره آز………………………………………………………………………………………………… ۵۲
۲-۸-۹- بررسی همولیزین……………………………………………………………………………………………. ۵۳
۲-۸-۱۰- کشت در  محیط کشت TSI آگار…………………………………………………………………….. ۵۳
۲-۹- تست حساسیت آنتی بیوتیکی (آنتی بیوگرام)……………………………………………………………. ۵۵
۲-۹-۱-تهیه کدورت  لوله نیم مک فارلند ……………………………………………………………………….. ۵۵
۲-۹-۲- تهیه سویه های استاندارد………………………………………………………………………………….. ۵۵
۲-۹-۳- تهیه غلظت از  نانو ذره نقره……………………………………………………………………………… ۵۶
۲-۱۰- بررسی اثرات ضد میکروبی نانو ذره نقره به روش انتشار دیسک در آگار………………………. ۵۶
۲-۱۱- تعیین MICو MBC نانو ذره نقره ………………………………………………………………………… ۵۶

فصل سوم:نتایج

۳-۱-کلنی های جدا شده باکتری ها از نمونه بیمار (شکل های شماره ۱ تا ۴) …………………………… ۵۹
۳-۲-تست آنتی بیوگرام………………………………………………………………………………………………. ۶۲
۳-۲-۱-نتایج مربوط به تست دیسک دیفیوژن…………………………………………………………………… ۶۲
۳-۲-۲- نتایج مربوط به تست MIC وMBC…………………………………………………………………….. 67

فصل چهارم:بحث وپیشنهاد

بحث ……………………………………………………………………………………………………………………… ۷۷
پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………. ۸۶
منابع ……………………………………………………………………………………………………………………… ۸۷

فهرست جداول

جدول ۲_۱ وسایل و دستگاه‌های مورد استفاده در آزمایش…………………………………………………… ۳۰
جدول ۲-۲ دستگاه‌هایی که برای آنالیز مورد استفاده قرار گرفتند……………………………………………. ۳۳
جدول ۲-۳ مواد مورد استفاده در آزمایش………………………………………………………………………… ۳۴
جدول ۳-۱ میانگین قطر هاله های عدم رشد(میلی متر) غلظت های مختلف نانو ذره نقره با مو لاریته ۰۲/ ۰ در مقابل سویه های استاندارد منتخب در روش Diskdiffusion………………………………………………………………………. 64
جدول ۳-۲ میانگین قطر هاله های عدم رشد( میلی متر) غلظت های مختلف نانو ذره نقره با مو لاریته ۰۵/ ۰ در مقابل سویه های استاندارد منتخب به روش DiskdiffusionAgar………………………………………………………………… 65
جدول ۳-۳ میانگین قطر هاله های عدم رشد ( میلی متر) غلظت های مختلف نانو ذره نقره با مو لاریته ۰۲/ ۰ در مقابل ایزوله های های کلینیکی منتخب به روش AgarDisc diffusion…………………………………………………………… 66
جدول ۳-۴ میانگین قطر هاله های عدم رشد(میلی متر) غلظت های مختلف نانو ذره نقره با مو لاریته ۰۵/ ۰ در مقابل ایزوله های کلینیکی منتخب به روش Agar Disc diffusion………………………………………………………………… 67
جدول ۳-۵ میانگین  میزان MIC(ppm)   و (ppm) MBC  نانو ذره نقره با مو لاریته ۰۲/ ۰ در مقابل سویه های استاندارد منتخب در روش Macro dilution……………………………………………………………………………………………. 68
جدول ۳-۶ میانگین  میزان MIC(ppm)  و (ppm) MBC  نانو ذره نقره با  مو لاریته ۰۲/ ۰ در مقابل ایزوله های کلینیکی منتخب به روش ماکرودایلوشن……………………………………………………………………………………………….. ۷۰
جدول ۳-۷ میانگین  میزان MIC(ppm)   و (ppm) MBC  نانو ذره نقره با  مو لاریته ۰۵/ ۰ در مقابل سویه های استاندارد منتخب به روش ماکرو دایلوشن براث……………………………………………………………………………………….. ۷۲
جدول ۳-۸ میانگین  میزان MIC(ppm)   و (ppm) MBC  نانو ذره نقره با مو لاریته ۰۵/ ۰ در مقابل ایزوله های کلینیکی منتخب به روش ِماکرو دایلوشن براث………………………………………………………………………………………….. ۷۴
جدول ۳-۹ میانگین قطر هاله های عدم رشد(میلی متر) آنتی بیوتیک جنتامیسین  در مقابل سویه های استاندارد منتخب به روش Agar Disk Diffusion……………………………………………………………………………………………….. 74
جدول ۳-۱۰ میانگین قطر هاله های عدم رشد( میلی متر) آنتی بیوتیک جنتامیسین  در مقابل ایزوله های کلینیکی منتخب به روش Disk diffusion………………………………………………………………………………………………………… 75
جدول ۴-۱ مقایسه قدرت آنتی باکتریال نانو ذره نقره (۲ ۰  / ۰ مولاریته ) با آنتی بیوتیک جنتامیسین علیه باکتری های کلینیکی مورد بررسی : (به روش انتشار دیسک)…………………………………………………………………………… ۸۳
جدول ۴-۲ مقایسه قدرت آنتی باکتریال نانو ذره نقره (۰۵/۰ مولاریته ) با آنتی بیوتیک جنتامیسین علیه باکتری های کلینیکی مورد بررسی 🙁 به روش انتشار دیسک )…………………………………………………………………………………. ۸۳
جدول ۴-۳ مقایسه قدرت آنتی باکتریال نانو ذره نقره (۰۲/ ۰مولاریته ) با آنتی بیوتیک جنتامیسین علیه باکتری های استاندارد مورد بررسی 🙁 به روش انتشار دیسک )…………………………………………………………………………………. ۸۴
جدول ۴-۴ مقایسه قدرت آنتی باکتریال نانو ذره نقره (۰۵/۰ مولاریته ) با آنتی بیوتیک جنتامیسین علیه باکتری های استاندارد مورد بررسی 🙁 به روش انتشار دیسک )…………………………………………………………………………………. ۸۴

فهرست شکل ها

شکل ۱-۱ فلز نقره……………………………………………………………………………………………………… ۲
شکل ۱ -۲: کاربرد  نانو سیلور در پزشکی………………………………………………………………………… ۷
شکل ۱-۳ کاربرد نانو ذره نقره در اماکن عمومی مانند بیمارستان ها…………………………………………. ۸
شکل ۱-۴ تصویر الکترونی Pseudomonas aeruginosa…………………………………………….. 20
شکل ۱-۵رنگ آمیزی گرم از خوشه‌هایStaphylococcus aureu…………………………………….. 22
شکل ۱-۶:تصویر الکترونی باکتری E.Coli……………………………………………………………………… 23
شکل ۱-۷: هاله های ایجاد شده در دیسک  آنتی بیوگرام……………………………………………………… ۲۶
شکل ۲-۱ اضافه شدن نیترات آلومینیوم وکربنات سدیم به آب دیونیزه موجود در بشر…………………. ۳۷
شکل۲-۲:تشکیل رسوب ژله ای  AlOOH……………………………………………………………………… 38
شکل۲-۳ رسوب خشک شده در دمای اتاق بعداز ۲۴ساعت…………………………………………………. ۳۸
شکل۲-۴:اضافه کردن نیترات نقره………………………………………………………………………………….. ۳۹
شکل ۲-۵: نقره آلومینا سنتز شده بعداز خشک شدن در کوره………………………………………………… ۴۰
شکل ۲-۶ نمایی از الگوی XRD  ،    Al₂O₃درمقاله [۳۹]………………………………………………… ۴۳
شکل ۲-۷ نمایی از الگوی XRD  ،    Al₂O₃سنتز شده……………………………………………………. ۴۴
شکل ۲-۸ :عکس TEM از نانو ذره سنتز شده nm )  ۱۰۰ با بزرگنمایی ۱۲۵k)…………………….. 45
شکل ۲-۹:عکس TEMاز نانو ذره سنتز شده ( nm 50  با بزرگنمایی ۲۰۰k)…………………………. 46
شکل۲-۱۰ :عکس TEMاز نانو ذره سنتز شده(   nm50 با بزرگنمایی ۲۰۰k)………………………… 47
شکل۲-۱۱ :عکسTEMاز نانو ذره سنز شده  (nm 50 با بزرگنمایی ۲۶۰ )…………………………… ۴۸
شکل۲-۱۲  محیط های کشت میکروبیولوژی…………………………………………………………………….. ۵۴
شکل۲-۱۳٫ محیط های کشت افتراقی جهت تشخیص اشرشیا کلی………………………………………… ۵۴
شکل ۳-۱ :کلنی های E.Coli جداشده ازنمونه های بیمار درمحیط کشت EMB…………………….. 59
شکل۳-۲ :کلنی های E.Coli PTCC1552 درمحیط کشت SIM……………………………………… 60
شکل ۳-۳:کلنی های P.aeruginosa جدا شده از نمونه های بیمار درمحیط کشت نونترینت آگار.. ۶۱
شکل ۳-۴: کلنی های استافیلوکوکوس اورئوس در محیط کشت مانیتول سا لت آگا ر………………….. ۶۲
شکل ۳-۵ :هاله های عدم رشد سودوموناس ائروژینوزا در برابر نانوذره نقره در غلظت های مختلف.. ۶۳
شکل ۳-۶ :هاله های عدم رشد اشرشیا کلی در برابر نانوذره نقره در غلظت های مختلف……………… ۶۳
شکل ۳-۷ میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره (۱۲/۳ میلی گرم در میلی لیتر )نقره با مولاریته۲ ۰ /۰ ۶۸
شکل ۳-۸ میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره (۱۲/۳میلی گرم در میلی لیتر ) نقره با مولاریته۲ ۰ /۰ ۶۹
شکل ۳-۹ میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره (۱۲/۳ میلی گرم در میلی لیتر ) نقره با مولاریته ۲ ۰/۰ ۷۰
شکل ۳-۱۰ میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره (۲۵/۶ میلی گرم در میلی لیتر ) نقره با مولاریته ۰۵/۰ ۷۱
شکل ۳-۱۱میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره  (۱۲/۳ میلی گرم در میلی لیتر) نقره با مولاریته۵ ۰/۰ ۷۱
شکل ۳-۱۲ میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره (۱۲/۳ میلی گرم در میلی لیتر )نقره با مولاریته ۵ ۰/۰ ۷۳
شکل ۳-۱۳ میزان حداقل غلظت مهاری نانو ذره (۱۲/۳میلی گرم در میلی لیتر ) نقره  با مولاریته۵ ۰/۰ ۷۳

روش های سنتز نانو مواد

*فعال سازی مکانیکی
*سل-ژل
*رسوب دهی شیمیایی از فاز بخار
*رسوب دهی فیزیکی از فاز بخار
*کند وپاش
*هیدروترمال وسولوترمال
*رسوبگذاری
*احیای الکتروشیمیایی
*تخریب حرارتی
*سونوشیمی
*لیتوگرافی

۱-۱-۱۲-۱-روش سل – ژل برای سنتز نانو ذره